1.使用新鲜清洁的水与乙腈。。。。。。冲洗系统，，，，，，，，确保系统清洁，，，，，，，，不含任何缓冲盐和污染物。。。。。。

2.取用色谱柱时阻止磕碰掉落。。。。。。

3.将丁基疏水色谱柱入口端毗连到系统上，，，，，，，，柱出口端先不要毗连，，，，，，，，色谱柱身上有箭头标明准确流向。。。。。。

4.在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，，，，，，，，然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。。。。。。

5.当溶剂匀称的从柱出口端流出，，，，，，，，停流速，，，，，，，，将色谱柱出口端接到系统检测器上（这样可以阻止气泡进入检测系统，，，，，，，，并且可快速抵达基线平衡）。。。。。。

6.重启流速，，，，，，，，凭证办法4的要领逐渐提高流速，，，，，，，，至通例剖析时所使用的流速。。。。。。

7.参考柱效测试报告中的要领，，，，，，，，使用该流动相条件平衡色谱柱，，，，，，，，通常需要使用5-10倍柱体积的流动相，，，，，，，，直至压力与基线稳固。。。。。。

8.测试丁基疏水色谱柱柱效。。。。。。若是没有柱效测试报告中的剖析物，，，，，，，，请厂家部分追求支持，，，，，，，，使用合适的浓度与进样量。。。。。。柱效效果略低于柱效测试报告属正常情形。。。。。。如效果显着偏低、峰形拖尾，，，，，，，，提醒色谱柱和/或所使用的液相系统处于非理想状态，，，，，，，，需要举行故障排查。。。。。。当使用2.1mm内径色谱柱时，，，，，，，，建议优化系统以镌汰谱带展宽，，，，，，，，包括：使用检测器微量流通池，，，，，，，，镌汰进样器loop环体积，，，，，，，，使用较小内径（如0.005''或0.12mm）的系统管路。。。。。。并确保管路与丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积。。。。。。当使用小颗粒填料（如2.5μm）短柱举行快速疏散时，，，，，，，，需要思量以下因素：

1.确保管路丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积，，，，，，，，只管优化系统镌汰谱带展宽；；；；；；；；

1.提高采样频率至10点/秒以上；；；；；；；；

3.较小粒径的色谱柱爆发的柱压较高，，，，，，，，而较小粒径要抵达*色谱效率所需的线速率较高，，，，，，，，请凭证所用LC系统的现真相形调理流速；；；；；；；；

4.可使用较高的柱温来赔偿小颗粒造成的压力升高，，，，，，，，例如40?C。。。。。。使用杂化颗粒反相色谱柱时，，，，，，，，可使用45?C或更高。。。。。。