TSK凝胶色谱柱的主要参数:
⑴柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,,,,,,,从柱的底板到凝胶沉积外貌的体积。。。。。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,,,,,,,因引柱体积又称“床”体积,,,,,,,常用Vt 体现。。。。。
⑵外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,,,,,,,这部分体积称外水体积,,,,,,,亦称间隙体积,,,,,,,常用Vo体现。。。。。
⑶内水体积:由于凝胶为三维网状结构,,,,,,,颗粒内部仍有空间,,,,,,,液体可进入颗粒内部,,,,,,,这就分间隙的总和为内水体积,,,,,,,又称定相体积,,,,,,,常用Vi体现。。。。。 不包括固体支持物的体积(Vg)。。。。。
⑷峰洗脱体积:是指被疏散物质通过凝胶柱所需洗脱液有体积,,,,,,,常用Ve 体现。。。。。当使用样品的体积很少时,,,,,,,(与洗脱体积较量可以忽略不计),,,,,,,在洗脱图中,,,,,,,从加样到峰顶位置所用洗脱液体积为Ve。。。。。 当样品体积与洗脱体积较量不可忽略时,,,,,,,洗脱体积盘算可以从样品体积的一半到峰顶位置。。。。。当样品很大时,,,,,,,洗脱体积盘算可以从应用样品最先到洗脱峰升高的弯曲点(或半高处)。。。。。
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TSK凝胶色谱柱凝胶的种类:
(一)交联葡聚糖凝胶(Sephadex)
⑴ Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephndex,,,,,,,差别规格型号的葡聚糖用英文字母G体现,,,,,,,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。。。。。例如,,,,,,,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,,,,,,,同样G-200克每克千胶吸水20克。。。。。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,,,,,,,G-15,,,,,,,G-25,,,,,,,G-50,,,,,,,G-75,,,,,,,G-100,,,,,,,G-150,,,,,,,和G-200。。。。。因此,,,,,,,“G”反应,,,,,,,凝胶的交联水平,,,,,,,膨胀水平及分部规模。。。。。
⑵ Sephadex LH-20,,,,,,,是─Sephadex G-25的羧丙基衍生物,,,,,,, 能溶于水及亲脂溶剂,,,,,,,用于疏散不溶于水的物质。。。。。
(二)琼脂糖凝胶:
商品名许多,,,,,,,常见的有,,,,,,,Sepharose(瑞典,,,,,,,pharmacia ),,,,,,,Bio-Gel-A(美国Bio-Rad)等。。。。。琼脂糖凝胶是依赖糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,,,,,,,网状结构的疏密依赖琼脂糖的浓度。。。。。一样平常情形下,,,,,,,它的结构是稳固的,,,,,,,可以在许多条件下使用(如水,,,,,,,pH4-9规模内的盐溶液)。。。。。琼脂糖凝胶在40℃以上最先融化,,,,,,,也不可高压消毒,,,,,,,可用化学灭菌活处置惩罚。。。。。
(三)聚丙烯酰胺凝胶:
是一种人工合成凝胶,,,,,,,是以丙烯酰胺为单位,,,,,,, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,,,,,,,经干燥破损或加工成形制成粒状,,,,,,,控制交联剂的用量可制成种种型号的凝胶。。。。。交联剂越多,,,,,,,孔隙越小。。。。。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶——P (Bio-Gel P),,,,,,,由美国Bio-Rod厂生产,,,,,,,型号许多,,,,,,,从P-2至P-300共10种,,,,,,,P 后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。。。。。
(四)聚苯乙烯凝胶
商品为Styrogel ,,,,,,, 具有大网孔结构,,,,,,, 可用于疏散分子量1600到40,,,,,,,000,,,,,,,000的生物大分子,,,,,,,适用于有机多聚物,,,,,,,分子量测定和脂溶性自然物的分级,,,,,,,凝胶机械强度好,,,,,,,洗脱剂可用甲基亚砜。。。。。