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丁基疏水色谱柱在使用时有哪些需要注重的呢??????? ?

更新时间:2020-09-21浏览:2096次
   丁基疏水色谱柱是一款以粒径为2.5 um的,,,,,,,丁基键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水作用色谱柱。。。。。。。。适用于卵白质、单抗、酶等生物大分子的疏散剖析。。。。。。。。
  丁基疏水色谱柱的使用注重事项:
  1、使用新鲜清洁的水与乙腈。。。。。。。。冲洗系统,,,,,,,确保系统清洁,,,,,,,不含任何缓冲盐和污染物。。。。。。。。
  2、取用色谱柱时阻止磕碰掉落。。。。。。。。
  3、将丁基疏水色谱柱入口端毗连到系统上,,,,,,,柱出口端先不要毗连,,,,,,,色谱柱身上有箭头标明准确流向。。。。。。。。
  4、在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,,,,,,,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。。。。。。。。
  5、当溶剂匀称的从柱出口端流出,,,,,,,停流速,,,,,,,将色谱柱出口端接到系统检测器上(这样可以阻止气泡进入检测系统,,,,,,,并且可快速抵达基线平衡)。。。。。。。。
  6、重启流速,,,,,,,凭证办法4的要领逐渐提高流速,,,,,,,至通例剖析时所使用的流速。。。。。。。。
  7、参考柱效测试报告中的要领,,,,,,,使用该流动相条件平衡色谱柱,,,,,,,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,,,,,,,直至压力与基线稳固。。。。。。。。
  8、测试丁基疏水色谱柱柱效。。。。。。。。若是没有柱效测试报告中的剖析物,,,,,,,请厂家部分追求支持,,,,,,,使用合适的浓度与进样量。。。。。。。。柱效效果略低于柱效测试报告属正常情形。。。。。。。。如效果显着偏低、峰形拖尾,,,,,,,提醒色谱柱和/或所使用的液相系统处于非理想状态,,,,,,,需要举行故障排查。。。。。。。。当使用2.1mm内径色谱柱时,,,,,,,建议优化系统以镌汰谱带展宽,,,,,,,包括:使用检测器微量流通池,,,,,,,镌汰进样器loop环体积,,,,,,,使用较小内径(如0.005''或0.12mm)的系统管路。。。。。。。。并确保管路与丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积。。。。。。。。当使用小颗粒填料(如2.5μm)短柱举行快速疏散时,,,,,,,需要思量以下因素:
  1、确保管路丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积,,,,,,,只管优化系统镌汰谱带展宽;;;;;;
  2、提高采样频率至10点/秒以上;;;;;;
  3、较小粒径的色谱柱爆发的柱压较高,,,,,,,而较小粒径要抵达*色谱效率所需的线速率较高,,,,,,,请凭证所用LC系统的现真相形调理流速;;;;;;
  4、可使用较高的柱温来赔偿小颗粒造成的压力升高,,,,,,,例如40?C。。。。。。。。使用杂化颗粒反相色谱柱时,,,,,,,可使用45?C或更高。。。。。。。。
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