1、使用新鲜清洁的水与乙腈。。。。。。。冲洗系统，，，，，确保系统清洁，，，，，不含任何缓冲盐和污染物。。。。。。。

　　2、取用色谱柱时阻止磕碰掉落。。。。。。。

　　3、将丁基疏水色谱柱入口端毗连到系统上，，，，，柱出口端先不要毗连，，，，，色谱柱身上有箭头标明准确流向。。。。。。。

　　4、在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱，，，，，然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。。。。。。。

　　5、当溶剂匀称的从柱出口端流出，，，，，停流速，，，，，将色谱柱出口端接到系统检测器上（这样可以阻止气泡进入检测系统，，，，，并且可快速抵达基线平衡）。。。。。。。

　　6、重启流速，，，，，凭证办法4的要领逐渐提高流速，，，，，至通例剖析时所使用的流速。。。。。。。

　　7、参考柱效测试报告中的要领，，，，，使用该流动相条件平衡色谱柱，，，，，通常需要使用5-10倍柱体积的流动相，，，，，直至压力与基线稳固。。。。。。。

　　8、测试丁基疏水色谱柱柱效。。。。。。。若是没有柱效测试报告中的剖析物，，，，，请厂家部分追求支持，，，，，使用合适的浓度与进样量。。。。。。。柱效效果略低于柱效测试报告属正常情形。。。。。。。如效果显着偏低、峰形拖尾，，，，，提醒色谱柱和/或所使用的液相系统处于非理想状态，，，，，需要举行故障排查。。。。。。。当使用2.1mm内径色谱柱时，，，，，建议优化系统以镌汰谱带展宽，，，，，包括：使用检测器微量流通池，，，，，镌汰进样器loop环体积，，，，，使用较小内径（如0.005''或0.12mm）的系统管路。。。。。。。并确保管路与丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积。。。。。。。当使用小颗粒填料（如2.5μm）短柱举行快速疏散时，，，，，需要思量以下因素：

　　1、确保管路丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积，，，，，只管优化系统镌汰谱带展宽；；；；；；

　　2、提高采样频率至10点/秒以上；；；；；；

　　3、较小粒径的色谱柱爆发的柱压较高，，，，，而较小粒径要抵达*色谱效率所需的线速率较高，，，，，请凭证所用LC系统的现真相形调理流速；；；；；；

　　4、可使用较高的柱温来赔偿小颗粒造成的压力升高，，，，，例如40?C。。。。。。。使用杂化颗粒反相色谱柱时，，，，，可使用45?C或更高。。。。。。。