反相色谱柱是指使用非极性的反相介质为牢靠相，，，，，，极性有机溶剂的水溶液为流动相，，，，，，凭证溶质极性(疏水性)的差别举行溶质疏散与纯化的洗脱色谱法。。。。。。。。与HIC一样，，，，，，RPC中溶质也通过疏水性相互作用分派于牢靠相外貌，，，，，，可是，，，，，，RPC牢靠相外貌*被非极性基团所笼罩，，，，，，体现出强烈的疏水性。。。。。。。。因此，，，，，，必需用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液举行溶质的洗脱疏散。。。。。。。。

　　溶质在反相介质上的分派系数取决于溶质的疏水性，，，，，，一样平常疏水性越大，，，，，，分派系数越大。。。。。。。。当牢靠相一准时，，，，，，可以通过调理流动相的组成调解溶质的分派系数。。。。。。。。RPC主要应用于相对分子质量低于5000，，，，，，特殊是1000以下的非极性小分子物质的剖析和纯化，，，，，，也可以用于卵白质等生物大分子的剖析和纯化。。。。。。。。由于反相介质外貌为强烈疏水性，，，，，，并且流动相为低极性的有机溶剂，，，，，，生物活性大分子在RPC疏散历程中容易变性失活，，，，，，以是，，，，，，以接纳生物活性卵白质为目的时，，，，，，应注重选用相宜的反相介质。。。。。。。。

　　反相介质的商品种类繁多，，，，，，其中醉具代表性的是以硅胶为载体，，，，，，通过外貌键合非极性分子层制备。。。。。。。。通过控制反应时间和温度，，，，，，可获得性能稳固的反相介质。。。。。。。。在硅胶基质的反相填料中，，，，，，以键合有C18、C8、C2的球形多孔填料醉为常见，，，，，，用途醉广。。。。。。。。

　　RPC牢靠相大多是硅胶外貌键合疏水基团，，，，，，基于样品中的差别组分和疏水基团之间疏水作用的差别而疏散。。。。。。。。在生物大分子疏散中，，，，，，多接纳离子强度较低的酸性水溶液，，，，，，添加一定量乙腈、异丙醇或甲醇等与水互溶的有机溶剂作为流动相。。。。。。。。