离子交流色谱是使用离子交流原理和液相色谱手艺的团结来测定溶液中阳离子和阴离子的一种疏散剖析要领。。。。。。。。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交流色谱法举行疏散。。。。。。。。离子交流色谱手艺常被用于卵白质、寡核苷酸、多肽、病毒、噬菌体、多糖等的纯化。。。。。。。。
离子交流色谱的基来源理:
离子交流色谱是卵白纯化手艺中心常用的一种纯化要领,,,,,,,,其原理是指疏散物质所带的电荷可与离子交流剂所带的相反电荷团结,,,,,,,,这种带电分子和牢靠相之间的结相助用是可逆的,,,,,,,,在改变PH或者用逐渐增添离子强度的缓冲液洗脱时,,,,,,,,离子交流剂上团结的物质可与洗脱液中的离子爆发交流而被洗脱到溶液中。。。。。。。。由于差别物质的电荷差别,,,,,,,,其与离子交流剂的团结能力也差别,,,,,,,,以是被洗脱到溶液中的顺序也差别,,,,,,,,从而被疏散出来。。。。。。。。
影响离子交流色谱保存行为的因素有哪些?????
离子交流色谱法的保存行为和选择性与被疏散的离子、离子交流剂以及流动相的性子等有关。。。。。。。。离子交流剂对差别离子的交流选择性差别,,,,,,,,一样平常来说,,,,,,,,离子的价数越高,,,,,,,,原子序数越大,,,,,,,,水和离子半径约小,,,,,,,,则该离子在离子交流剂上的选择性系数就越大。。。。。。。。例如,,,,,,,,强酸型阳离子交流树脂对阳离子的选择性系数顺序为:
Fe3+>Al2+>Ba2+》Pb2+>Sr2+>Ca2+>Ni2+>Cd2+》Cu2+》Co2+》Mg2+》Zn2+》Mn2+>Ag+>Cs>Rb+>K+》NH4+>Na+>H+>Li+。。。。。。。。
弱酸型阳离子交流树脂的基团(如一COOH)的离解受溶液中H+抑制,,,,,,,,以是H+在该类树脂上的保存能力很强,,,,,,,,甚至大于二价、三价阳离子。。。。。。。。
强碱型阴离子交流树脂对阴离子的选择性系数顺序为:柠檬酸根>PO43->SO42->I->NO3->SCN->NO2->Cl->HCO3->CH3COO->OH->F-。。。。。。。。
离子的保存还受流动相的组成和pH值的影响:交流能力强、选择性系数大的离子组成的流动相具有强的洗脱能力。。。。。。。。流动相的离子强度增大,,,,,,,,其洗脱能力增强,,,,,,,,使组分的保存值降低。。。。。。。。强离子交流树脂的交流容量在很宽的范同内不随流动相的pH值转变。。。。。。。。pH值的调理主要体现其对弱电解质离解的控制,,,,,,,,溶质的离解受到抑制,,,,,,,,其保存时间变短。。。。。。。。因此,,,,,,,,pH值的转变,,,,,,,,对弱离子交流树脂的交流能力影响较大。。。。。。。。