生物剖析色谱柱的选择
生物剖析色谱柱就是填装有牢靠相的柱管。 。。 。 。。。。宏观上， ，，，，色谱柱是由柱管和填料组成， ，，，，那么生物剖析色谱柱的选择就要从填料和柱管规格来选择。 。。 。 。。。。
1.填料的选择：即凭证化合物的属性选择适合其疏散的色谱模式及牢靠相。 。。 。 。。。。
2.柱规格选择：生物剖析色谱柱规格的选摘要从内径和柱长两个指标来思量。 。。 。 。。。。差别内径的色谱柱用途：2.1mm和3.0mm内径色谱柱一样平常用于超液相色谱剖析UPLC（剖析时间短， ，，，，效率高）；；；； ；；；4.6mm内径色谱柱一样平常用于通例液相色谱剖析HPLC；；；； ；；；10.0-300mm内径色谱柱一样平常用于制备色谱PreHPLC。 。。 。 。。。。差别柱长色谱柱优势：UPLC一样平常柱长为50-100mm；；；； ；；；通例HPLC和PreHPLC中， ，，，，50-100mm柱长适用于易疏散样品， ，，，，且剖析时间短。 。。 。 。。。。150-300mm柱长适于难疏散或疏散度要求高的样品， ，，，，剖析时间长。 。。 。 。。。。柱长越长， ，，，，其柱效越高， ，，，，但由于装柱手艺限制， ，，，，300mm以上长度， ，，，，柱效会相对更低， ，，，，因此很少有大于300mm的柱长。 。。 。 。。。。
微观上， ，，，，色谱柱填料的规格又包括粒径， ，，，，孔径， ，，，，比外貌积， ，，，，封尾水平。 。。 。 。。。。粒径：色谱柱所装填料的颗粒直径。 。。 。 。。。。粒径巨细一样平常有1.7μm， ，，，，2.7μm， ，，，，3.5μm， ，，，，5μm， ，，，，10μm， ，，，，15μm， ，，，，20μm， ，，，，20-40μm， ，，，，40-60μm。 。。 。 。。。。其中1.7-3.5μm主要用于UPLC快速剖析， ，，，，5μm填料主要用于通例HPLC， ，，，，10μm-20μm通常用于高压制备色谱（PreHPLC）， ，，，，20-40μm和40-60μm为粒径不匀称填料， ，，，，用于中低压制备色谱（MPLC）。 。。 。 。。。。
粒径越小， ，，，，柱压越高， ，，，，疏散度及迅速度也越高。 。。 。 。。。。� ？ ？？？拙叮禾盍峡帕５耐饷埠湍诓康目椎某叽纭� 。。 。 。。。。100?， ，，，，150?， ，，，，200?， ，，，，300?（更适合疏散空间结构较大的大分子化合物， ，，，，如核苷酸， ，，，，卵白等）。 。。 。 。。。。比外貌积：单位质量填料颗粒外貌和内部孔的面积之和。 。。 。 。。。。比外貌积越大， ，，，，与样品的接触位点越多， ，，，，载样量越大， ，，，，对样品的保存越强， ，，，，柱效越高。 。。 。 。。。。
封尾：将硅胶颗粒外貌的裸露的硅羟基用小分子硅烷键合掉。 。。 。 。。。。封尾降低了硅胶填料的活性， ，，，，镌汰填料对碱性化合物形成氢键而造成的拖尾。 。。 。 。。。。同时封尾的色谱柱比不封尾的少了氢键作用的选择性， ，，，，因此对组分重大样品更适合选择不封尾或一次封尾的色谱柱。 。。 。 。。。。
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