填料主要以硅胶为基质 ，，，，，，，在其外貌键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱 ，，，，，，，其它常用的反相柱尚有C8、C4、C2和苯基柱等。。 。。。另外尚有离子交流柱 ，，，，，，，GPC柱 ，，，，，，，聚合物填料柱等。。 。。。
反相色谱柱举行样品剖析时：
1确保流动相清洁 ，，，，，，，每隔24-48小时就应新配水相流动相 ，，，，，，，并同时替换或仔细洗濯流动相溶剂瓶 ，，，，，，，以阻止流动相长菌。。 。。。确保实验室纯水系统事情正常。。 。。。
2确保样品不含颗粒型杂质。。 。。。如样品过脏 ，，，，，，，或有微粒保存 ，，，，，，，需要思量适合的样品制备要领。。 。。。在使用样品过滤器时 ，，，，，，，确保滤膜为0.22μm ，，，，，，，且与样品溶剂*兼容（不爆发消融）。。 。。。也可思量使用高速离心法去除颗粒性杂质 ，，，，，，，例如8000rpm转速以上离心20分钟后 ，，，，，，，移取样品上清液进样。。 。。。
3确保样品溶液与流动相条件兼容 ，，，，，，，进样后不会爆发沉淀、或溶剂不互溶情形。。 。。。通常使用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液(即有机溶剂比例较低)消融或稀释样品 ，，，，，，，这样可以获得的峰形和检测迅速度。。 。。。
4如系统在线混淆天生流动相 ，，，，，，，预先检查流动相各组分的兼容性。。 。。。例如 ，，，，，，，当磷酸盐缓冲液与高浓度乙腈（例如≥70%）混用时 ，，，，，，，可能爆发盐析出。。 。。。
5相识色谱柱的操作使用限度。。 。。。若是所使用的流动相条件、柱温、以及样品溶液条件 ，，，，，，，倒运于色谱柱寿命时 ，，，，，，，请使用�；；；；；；；ぶ匝由熘倜�。 。。。
6在使用流动相举行柱平衡之前 ，，，，，，，若是流动相中含有可能析出的缓冲盐 ，，，，，，，先使用5倍柱体积的有机溶剂-水溶液举行过渡。。 。。。例如 ，，，，，，，在使用40/60甲醇/磷酸盐缓冲液流动相之前 ，，，，，，，先使用5倍柱体积的40/60甲醇/纯水溶液冲洗色谱柱。。 。。。
7在通例剖析历程中 ，，，，，，，每针或距离若干针洗濯柱内可能积累的污染物。。 。。。完身剖析后 ，，，，，，，*洗濯色谱柱 ，，，，，，，除去柱内缓冲盐和污染物。。 。。。
8在反相色谱柱使用历程中 ，，，，，，，按期举行柱效测试 ，，，，，，，纪录塔板数与压力 ，，，，，，，从而追踪监控色谱柱的性能转变。。 。。。柱效测试要领应牢靠。。 。。。
9反相色谱柱应生涯于合适的高比例或100%有机相（如乙腈或甲醇）中。。 。。。如色谱柱使用于高温或PH条件 ，，，，，，，或停用色谱柱凌驾72小时 ，，，，，，，用100%乙腈生涯色谱柱。。 。。。
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