1.填料的选择：即凭证化合物的属性选择适合其疏散的色谱模式及牢靠相（前一章关于化合物属性中已讲到）。。。。。

2.柱规格选择：生物剖析色谱柱规格的选摘要从内径和柱长两个指标来思量。。。。。

差别内径的色谱柱用途：2.1mm和3.0mm内径色谱柱一样平常用于超液相色谱剖析UPLC（剖析时间短，，，，，，效率高）；；；；；；；；4.6mm内径色谱柱一样平常用于通例液相色谱剖析HPLC；；；；；；；；10.0-300mm内径色谱柱一样平常用于制备色谱PreHPLC。。。。。

差别柱长色谱柱优势：UPLC一样平常柱长为50-100mm；；；；；；；；通例HPLC和PreHPLC中，，，，，，50-100mm柱长适用于易疏散样品，，，，，，且剖析时间短。。。。。150-300mm柱长适于难疏散或疏散度要求高的样品，，，，，，剖析时间长。。。。。柱长越长，，，，，，其柱效越高，，，，，，但由于装柱手艺限制，，，，，，300mm以上长度，，，，，，柱效会相对更低，，，，，，因此很少有大于300mm的柱长。。。。。

微观上，，，，，，色谱柱填料的规格又包括粒径，，，，，，孔径，，，，，，比外貌积，，，，，，封尾水平。。。。。

粒径：色谱柱所装填料的颗粒直径。。。。。下图为10μm硅胶填料在显微镜下的图片。。。。。

粒径巨细一样平常有1.7μm，，，，，，2.7μm，，，，，，3.5μm，，，，，，5μm，，，，，，10μm，，，，，，15μm，，，，，，20μm，，，，，，20-40μm，，，，，，40-60μm。。。。。其中1.7-3.5μm主要用于UPLC快速剖析，，，，，，5μm填料主要用于通例HPLC，，，，，，10μm-20μm通常用于高压制备色谱（PreHPLC），，，，，，20-40μm和40-60μm为粒径不匀称填料，，，，，，用于中低压制备色谱（MPLC）。。。。。

粒径越小，，，，，，柱压越高，，，，，，疏散度及迅速度也越高。。。。。

孔径：填料颗粒的外貌和内部的孔的尺寸。。。。。100?，，，，，，150?，，，，，，200?，，，，，，300?（更适合疏散空间结构较大的大分子化合物，，，，，，如核苷酸，，，，，，卵白等）。。。。。

比外貌积：单位质量填料颗粒外貌和内部孔的面积之和。。。。。比外貌积越大，，，，，，与样品的接触位点越多，，，，，，载样量越大，，，，，，对样品的保存越强，，，，，，柱效越高。。。。。

封尾：将硅胶颗粒外貌的裸露的硅羟基用小分子硅烷键合掉。。。。。

封尾降低了硅胶填料的活性，，，，，，镌汰填料对碱性化合物形成氢键而造成的拖尾。。。。。同时封尾的色谱柱比不封尾的少了氢键作用的选择性，，，，，，因此对组分重大样品更适合选择不封尾或一次封尾的色谱柱。。。。。